Snakemake：缺少所有规则的输入文件

如何解决Snakemake：缺少所有规则的输入文件

我正在开发我的第一个 Snakemake 工作流程，但由于错误而卡住了。

我想先从一条规则开始测试我的代码。我创建了 fastQC 规则。但是，当我运行我的 snakemake 时，我收到以下错误消息：

MissingInputException in line 24 of /ngs/prod/nanocea_project/test/Snakefile:
Missing input files for rule all:
stats/fastqc/02062021_1/02062021_1_fastqc.html
stats/fastqc/02062021_1/02062021_1_fastqc.zip
stats/fastqc/02062021_2/02062021_2_fastqc.html
stats/fastqc/25022021_2/25022021_2_fastqc.zip
stats/fastqc/25022021_2/25022021_2_fastqc.html
stats/fastqc/02062021_2/02062021_2_fastqc.zip

这是我的代码：

import glob
import os

###Global Variables###

FORMATS=["zip","html"]
OUTDIR="/ngs/prod/nanocea_project/test/stats/fastqc"
DIR_FASTQ="/ngs/prod/nanocea_project/test/reads"

###FASTQ Files###

def list_samples(DIR_FASTQ):
        SAMPLES=[]
        for file in glob.glob(DIR_FASTQ+"/*.fastq.gz"):
                base=os.path.basename(file)
                sample=(base.replace('.fastq.gz',''))
                SAMPLES.append(sample)
        return(SAMPLES)

SAMPLES=list_samples(DIR_FASTQ)

###Rules###

rule all:
        input:
                expand("stats/fastqc/{sample}/{sample}_fastqc.{ext}",sample=SAMPLES,ext=FORMATS)

rule fastqc:
        input:
                expand(DIR_FASTQ+"/{sample}.fastq.gz",sample=SAMPLES)
        output:
                expand(OUTDIR+"/{sample}_fastqc.{ext}",ext=FORMATS)
        threads:
                16
        conda:
                "envs/fastqc.yaml"
        shell:
                """
                mkdir stats/fastqc/{sample}
                fastqc {input} -o {OUTDIR}/{sample} -t {threads}
                """

这是我的文件结构：

|
|_ Snakefile
|
|_/reads
|   |
|   |_25022021_2.fastq.gz
|   |
|   |_02062021_1.fastq.gz
|   |
|   |_02062021_2.fastq.gz
|
|_/envs
|   |
|   |_fastqc.yaml
|
|_/stats
|   |
|   |_/fastqc

我在其他主题中搜索了问题的解决方案，但我的工作流程无法正常工作。

你有什么想法吗？

谢谢！

在 dariober 回答后编辑

感谢您的回答。经过多次尝试，唯一有效的解决方案是直接在 all 中编码，fastqc 规则完整路径。

第一个问题：为什么我的全局变量虽然修改为匹配我的所有规则，但不起作用？

第二个问题：现在第一个问题解决了，运行我的程序时出现了一个新问题： snakemake --use-conda --cores 40

RuleException in line 28 of /ngs/prod/nanocea_project/test/Snakefile: NameError: The name 'sample' is unknown in this context. Please make sure that you defined that variable. Also note that braces not used for variable access have to be escaped by repeating them,i.e. {{print $1}}

我尝试使用双大括号，但是当 mkdir 函数启动时，它会创建一个名为 {sample} 的文件夹。我不明白它为什么创建这个文件夹。

新代码：

import glob
import os

###Global Variables###

FORMATS=["zip","html"]
DIR_FASTQ="/ngs/prod/nanocea_project/test/reads"

###FASTQ Files###

def list_samples(DIR_FASTQ):
        SAMPLES=[]
        for file in glob.glob(DIR_FASTQ+"/*.fastq.gz"):
                base=os.path.basename(file)
                sample=(base.replace('.fastq.gz',''))
                SAMPLES.append(sample)
        return(SAMPLES)

SAMPLES=list_samples(DIR_FASTQ)

###Rules###

rule all:
        input:
                expand("/ngs/prod/nanocea_project/test/stats/fastqc/{sample}/{sample}_fastqc.{ext}",sample=SAMPLES)
        output:
                expand("/ngs/prod/nanocea_project/test/stats/fastqc/{sample}/{sample}_fastqc.{ext}",ext=FORMATS)
        threads:
                16
        conda:
                "envs/fastqc.yaml"
        shell:
                """
                mkdir stats/fastqc/{sample}
                fastqc {input} -o /ngs/prod/nanocea_project/test/stats/fastqc/{sample} -t {threads}
                """

解决方法

在规则中你拥有的一切：

stats/fastqc/...

但在规则 fastqc 中，扩展 OUTDIR 变量后，您有：

/ngs/prod/nanocea_project/test/stats/fastqc/...

即使指向同一个目录，两个字符串也不匹配，snakemake 会报错。